目的 了解床位数≥900张综合性医院的医院感染现状，为下一步制订医院感染防控措施提供参考依据。方法 回顾性收集2020年—2022年云南省医院床位数≥900张的综合性医院的医院感染现患率数据，分析各年度医院感染情况及变化趋势。结果 共纳入综合医院119所，调查患者166 745例，发生医院感染3 237例；感染部位以下呼吸道感染和泌尿道感染为主；医院感染现患率最高的科室是重症监护病房，其次是神经外科和血液病科。2020年—2022年医院感染现患率呈下降趋势，差异有统计学意义（2.08%vs. 1.99%vs. 1.79%；χ~2=14.301,P＜0.001）。共检出医院感染病原体1 315株，均以革兰阴性菌为主，其中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌较常见。2020年—2022年抗菌药物使用率、病原学送检率均呈上升趋势（χ~2=79.233、23.866,P＜0.001），Ⅰ类手术部位切口感染、Ⅰ类手术患者预防性抗菌药物使用率均呈下降趋势（χ~2=15.551、6.311,P＜0.05）。结论 目前，云南省综合医院的医院感染现患率呈下降趋势。但对重点科室的监管、病原体防控措施的落实和住院患者抗菌药物的合理使用仍是今后工作的重点。