资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ 中华系列
文章类型:
机构:
[1]云南省第一人民医院心脏大血管外科, 云南省昆明市,650032
外科片
心脏大血管外科
云南省第一人民医院
[2]云南省第一人民医院重症医学科, 云南省昆明市,650032
外科片
重症医学科
云南省第一人民医院
出处:
ISSN:
关键词:
间质干细胞
GATA4转录因子
肌细胞
心脏
细胞分化
摘要:
目的 探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过外泌体促进BMSCs向心肌细胞分化的能力.方法 2016年1-6月选取健康4周龄SPF级C57BL/6小鼠10只,通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠BMSCs,构建过表达GATA-4的BMSCs,并加入基因开启剂多西环素(DOX).采用ExoQuick-TC提取分泌的外泌体.将GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(A组)、空载体-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(B组)、BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养(C组)、BMSCs单独培养(D组)及小鼠心肌细胞单独培养(E组)72 h,采用荧光染色定性检测和反转录聚合酶链式反应(qPCR)定量检测肌钙蛋白T(cTnT)、α肌动蛋白(α-actin)、Connexin 43、肌间线蛋白(Desmin)的表达.结果 免疫荧光定性检测结果显示,A组GATA-4-BMSCs-外泌体与BMSCs共同培养72 h可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;B、C、D组可见细胞核被DAPI染为蓝色,没有表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin;E组可见细胞核被DAPI染为蓝色,表达出绿色的cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin.qPCR法检测结果显示,5组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较A组升高;A组和E组cTnT、α-actin、Connexin 43、Desmin表达水平较B组、C组和D组升高(P<0.05).结论 过表达GATA-4的BMSCs分泌的外泌体可以有效促进BMSCs向心肌细胞分化.
基金:
国家自然科学基金资助项目(81460073)%云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项(2014FB089)%云南省教育厅科学研究基金(2015Z051)%中国博士后科学基金(2015M582764XB)%成都医学院2015年度科研项目(CYZ15-18)%云南省医学后备人才(H-201607)
基金编号:
81460073
第一作者:
第一作者机构:
[1]云南省第一人民医院心脏大血管外科, 云南省昆明市,650032
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
贺继刚,韩金秀,李贝贝,等.外泌体对过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化能力促进作用的研究[J].中国全科医学.2018,21(14):1694-1698.