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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]云南省第一人民医院风湿免疫科,云南昆明,650032
内科片
风湿免疫科
云南省第一人民医院
[2]中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所遗传室,云南昆明,650118
出处：
ISSN：
关键词：
类风湿关节炎
滑膜成纤维细胞
原代培养
方法
比较
摘要：
目的：比较3种体外分离培养原代类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞（RASFs）的方法，寻求获得快速有效的培养途径．方法将来自关节镜RA滑膜切除术的滑膜组织分别采用胶原酶消化法、改良组织块法、双酶消化法进行培养．采用倒置相差显微镜观察细胞形态及生长特性，以Vimentin组织化学法进行鉴定．台盼兰计数培养14d后所得活细胞数目．结果3种原代分离培养方法均可成功培养出RASFs，符合RASFs的形态特征， Vimentin阳性细胞＞95%，其中：胶原酶消化培养法分离的RASFs16-20d细胞汇合度可达70%，约4周汇合度95%；改良组织块法分离的RASFs10～14 d细胞汇合度可达70%以上；双酶消化法分离的RASFs约4周细胞汇合度达85%．处理相同数量滑膜组织获得活细胞数目比较，改良组织块法组为（1.60±0.08）×106个，胶原酶消化法组（1.41±0.08）×106个，双酶消化法组（1.19±0.05）×106个，差异有统计学意义（P＜0.05）．培育原代RASFs细胞所需时间比较，胶原酶消化法需（267.50±16.58） min，双酶消化法需（183.75±11.08） min，改良组织块法需（149.10±13.71） min，差异有统计学意义（P＜0.05）．结论改良组织块培养法能最大限度地利用滑膜组织，获得最多数量原代RASFs细胞，是建立体外RA细胞模型最高效、快捷的方法．
基金：
云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金资助项目(2011FB215)
第一作者：
第一作者机构：
[1]云南省第一人民医院风湿免疫科,云南昆明,650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
马莎,林俊,于亮,等.三种培养原代滑膜成纤维细胞方法的比较[J].昆明医科大学学报.2016,37(06):52-56.
