目的：了解重症监护室（ICU）革兰阴性（G－）杆菌构成和耐药情况，为合理选用抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2010年1月至2012年12月云南省第一人民医院ICUG－杆菌分布情况，并用最小抑菌浓度（MIC）法和双纸片扩散法进行药敏实验。结果636株G－杆菌检出率最高的是鲍曼不动杆菌（45．3％），其次为肺炎克雷伯菌（17．1％）、铜绿假单胞菌（14．3％）和大肠埃希菌（13．4％）。标本来源以痰标本为主，分离率为84．9％。非发酵菌中鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌均呈现多重耐药，仅对多黏菌素、阿米卡星和米诺环素敏感；嗜麦芽窄食单胞菌对抗菌药物中介率较高。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β‐内酰胺酶（ESBLs）分离率分别为70．6％和69．7％，产ESBLs株对亚胺培南、美罗培南和阿米卡星敏感性较高，对其余抗菌药物耐药。产ESBLs株对抗菌药物耐药率和中介率明显高于非产ESBLs株。结论ICU分离到的G－杆菌以非发酵菌为主，并具有多重耐药特征，临床可选择多黏菌素或与氨基糖苷类联合用药进行治疗。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs分离率高。