目的：观察不同血清微环境中培养的细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer，CIK） CD4＋/CD8＋和Th1/Th2的动态改变，探讨最有利于恢复肿瘤患者CD4＋/CD8＋和Th1/Th2平衡的CIK细胞培养血清微环境和最适CIK细胞回输时机。方法将3例不同患者来源的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）用含10%肿瘤患者自体抗凝血浆培养基（ZT）在体外诱导培养成CIK细胞，并设含10%胎牛血清培养基（FBS）和无血清培养基（GT）作为对照。连续记录CIK细胞在三组血清微环境中的增殖情况，并分别收集培养第0、7、14和21天的CIK细胞和细胞培养上清。MTT法检测CIK细胞毒活性。流式细胞术检测CIK细胞CD3＋、CD4＋和CD8＋免疫表型。ELISA法检测细胞培养上清中Th1和Th2优势细胞因子IFN-γ和IL-13浓度，二者浓度比即为Th1/Th2比值。结果（1）CIK细胞增殖情况：三个血清微环境组间无显著差异。（2）CIK细胞肿瘤杀伤活性：培养至第7、14和21天的CIK细胞对K562的杀伤活性在不同血清微环境组依次为：ZT：（79.95±12.23）%、（93.86±2.38）%、（66.34±7.54）%，FBS：（71.02±14.79）%、（83.72±5.63）%、（58.37±7.57）%，GT：（40.92±4.66）%、（52.61±8.05）%、（41.43±5.25）%，CIK细胞肿瘤杀伤活性在同一血清组不同时间点间比较结果为ZT和FBS组在第14天均显著高于第7天和第21天（P＜0.01）；GT组在不同时间点间无显著差异。在不同血清微环境组相同时间点间比较的结果发现在第7、14和21天三个时间点，ZT和FBS组均显著高于GT组（P＜0.01）。（3）CIK细胞中CD4＋/CD8＋的动态改变：同一血清组不同时间点间的比较结果显示在第0天，肿瘤患者来源的PMBC CD4＋/CD8＋倒置，ZT组CD4＋/CD8＋在第7天升高至2.25±1.67，显著高于第0天（P＜0.05），但随即在第14天和第21天又恢复倒置现象；FBS组CD4＋/CD8＋一直维持倒置现象，并在第21天降低至0.04±0.55，极显著低于第0天（P＜0.01）；GT组CD4＋/CD8＋亦一直维持倒置现象，且在4个时间点间无显著差异。在相同的时间点不同血清微环境组间比较的结果显示在第7天，CD4＋/CD8＋比例在ZT组显著高于FBS和GT组（P＜0.05）；在第14天和第21天，三组间无显著差异。（4）CIK细胞中Th1/Th2的动态改变：CIK细胞Th1/Th2在相同血清组不同时间点间比较发现ZT和GT组在4个时间点一直维持Th1/Th2倒置，且4个时间点间无显著差异；FBS组Th1/Th2在第7天和第14天均极显著高于第0天（P＜0.01），Th1/Th2倒置现象被纠正，但在第21天又再次出现Th1/Th2倒置。在不同血清微环境组相同时间点间比较发现在第7天和第14天，FBS组Th1/Th2极显著高于ZT和GT组（P＜0.01）。结论不同血清微环境培养的CIK细胞CD4＋/CD8＋和Th1/Th2均呈动态改变趋势。提示在临床进行CIK细胞治疗时，应综合考虑患者的自身免疫状态、所采用的细胞培养血清微环境及CIK细胞培养过程中CD4＋/CD8＋和Th1/Th2的动态改变，制定个性化的治疗方案。