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文章类型:
机构:
[1]云南省第一人民医院普外一科,昆明,650032
外科片
普外一科
云南省第一人民医院
出处:
ISSN:
关键词:
利钠肽
C型
质粒
克隆
分子
基因疗法
兔
摘要:
目的 为开展C型利钠肽(CNP)基因治疗构建家兔CNP基因真核表达载体.方法 通过RT-PCR从家兔腹主动脉组织中克隆CNP基因全长编码区,将该DNA片段亚克隆至克隆载体pMD 18-T中,用Pst Ⅰ单酶切筛选出负向插入片段,用Hind Ⅲ和Kpn Ⅰ双酶切将目的DNA片段定向克隆至真核表达质粒pEGFP-N1中,然后用双酶切、DNA序列测定鉴定方法对重组质粒进行鉴定.结果 酶切及测序鉴定证实,家兔CNP基因全长编码区被准确插入到pEGFP-N1酶切位点Hind Ⅲ和Kpn Ⅰ中.结论 含家兔CNP基因真核表达载体的成功构建和鉴定为CNP基因治疗的研究奠定了基础.
基金:
国家自然科学基金资助项目(30860276)%云南省科技厅科研基金资助项目(2007C248M)%云南省科技厅-昆明医学院应用基础联合专项基金资助项目(2008CD042)
第一作者:
第一作者机构:
[1]云南省第一人民医院普外一科,昆明,650032
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
张剑,龚昆梅,肖乐,等.家兔C型利钠肽基因真核表达载体的构建及鉴定[J].重庆医学.2012,41(27):2796-2798+2788.