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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]昆明医科大学,云南昆明650500
[2]云南省第一人民医院普外一科,云南昆明650500
外科片
普外一科
云南省第一人民医院
[3]济南市疾病预防控制中心,山东济南250021
出处：
ISSN：
关键词：
CD1d基因
慢病毒
绿色荧光蛋白
基因构建
摘要：
目的:构建人免疫基因CD1d与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得CD1d的全外显子片段,使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿梭质粒转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定。取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞,荧光显微镜观察荧光表达。结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的CD1d基因序列完全一致。重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光。结论:成功构建了CD1d与GFP融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究CD1d基因的相关功能提供了适合的稳定转染载体。
基金：
云南省应用基础面上项目联合专项(2010CD196)；
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医科大学,云南昆明650500
[2]云南省第一人民医院普外一科,云南昆明650500
通讯作者：
通讯机构：
[1]昆明医科大学,云南昆明650500
[2]云南省第一人民医院普外一科,云南昆明650500
推荐引用方式(GB/T 7714)：
刘为军,任庆莹,师义,等.免疫基因CD1d和绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建[J].中国现代普通外科进展.2013,16(03):169-172.
