摘要:
目的研究在急性高眼压作用后不同再灌注时间水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)内化及其向溶酶体分选(降解)的规律,探讨AQP4的内化及其降解与视网膜胶质细胞水肿的关系。方法取72只体质量190~210 g的雌性SD大鼠(8周龄),在其左眼建立急性高眼压模型,并根据再灌注时间分为0、1、2、4、8、12 h组(n=12),应用免疫荧光双标的方法鉴定视网膜内胶质细胞的分布部位,并检测各组大鼠视网膜AQP4与早期内涵体抗原1(early endosome antigen 1,EEA1)、晚期内涵体标记物甘露糖-6-磷酸受体(mannose-6-phosphate receptor,MPR)及溶酶体相关膜蛋白-1(lysosomal-asso-ciated membrane protein-1,LAMP1)的共表达,分别计数AQP4阳性细胞及AQP4/EEA1、AQP4/LAMP1共表达细胞,计算其比例并进行统计学比较。结果视网膜内星形胶质细胞位于神经纤维层及节细胞层,Müller细胞位于内核层;在高眼压介导的再灌注损伤0~8 h,可见AQP4分别与EEA1、MPR有共表达,再灌注12 h则仅见AQP4与EEA1的共表达;再灌注1~12 h都可见AQP4与LAMP1的共表达,再灌注4 h,胶质细胞中AQP4与LAMP1共表达细胞的比例达到最大值(55.60±13.03)%,与其他时间点相比,差异有统计学意义(P<0.05),此后共表达细胞比例逐渐减少。结论高眼压所致的视网膜缺血-再灌注损伤可诱导AQP4发生内化,内化的AQP4可分选至溶酶体降解。AQP4的内化/降解可能在视网膜水肿的发生、发展中起作用。