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利用crispr/cas9基因编辑系统构建ets1基因敲除猪模型

Establishment of Porcine(Sus scrofa)ETS1 Knockout Model Using CRISPR/Cas9 Gene Editing System

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]昆明理工大学附属医院/云南省第一人民医院,昆明 650032 [2]中国科学院 昆明动物研究所,昆明 650223 [3]扬州大学 动物科学与技术学院,扬州 225009
出处:
ISSN:

关键词: ETS原癌基因1(ETS1) CRISPR/Cas9技术 系统性红斑狼疮

摘要:
ETS原癌基因1(E-twenty-six proto-oncogene 1, ETS1)基因在自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮,类风湿关节炎等)中起着重要作用,其缺失会导致免疫细胞的异常分化。ETS1基因在小鼠(Mus musculus)和人类(Homo sapiens)免疫系统中进行了广泛研究,但在猪(Sus scrofa)等大型模式动物中尚未得到充分研究。为了研究ETS1基因在大型模式动物中的作用。本研究通过基因编辑技术构建ETS1基因敲除的克隆猪。首先通过生物信息学分析了ETS1基因在人和猪中的同源性,然后利用CRISPR/Cas9技术构建ETS1基因敲除细胞系,再以敲除细胞系为供体细胞,通过体细胞核移植技术构建ETS1基因缺陷的狼疮样猪模型。结果显示,猪的ETS1氨基酸序列与人类具有高度的同源性。获得14株基因缺失的单克隆细胞系,7株为单等位基因缺失细胞系,7株为双等位基因缺失细胞系。通过体细胞核移植技术成功获得1头ETS1单等位基因缺失克隆猪和3头野生型克隆猪。该模型为解析ETS1基因在猪等大型模式动物免疫系统中的功能提供了关键工具,并为自身免疫性疾病大型动物模型的构建奠定基础。

基金:
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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明理工大学附属医院/云南省第一人民医院,昆明 650032 [2]中国科学院 昆明动物研究所,昆明 650223
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

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