目的 了解云南省第一人民医院儿科2014年1月至2017年12月新生儿患儿病原菌随时间区域的变迁规律、感染分布特点及耐药性情况,以期为临床合理应用提供参考.方法 回顾性分析云南省第一人民医院儿科504例患儿临床病例资料及其痰、血液、导管及尿液等标本,分析病原菌特点和抗菌药物耐药性情况.结果 504例患儿标本共分离出致病菌612株,以革兰阴性杆菌为主,375株(61.3％),其中大肠埃希菌最多见,肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌其次;革兰氏阳性菌以表皮葡萄球菌为多,224株(36.6％),其次为溶血葡萄球菌.感染主要为新生儿肺部感染,共420例,占68.63％,以革兰阴性杆菌居多.感染部位不同致病菌特点不同,痰液275株(44.93％)、血液156株(25.49％)以革兰氏阴性菌为主,导管102株(16.67％)以革兰氏阳性菌为多.时间区间不同病原菌存在差异,2016年期间,产ESBL、不产ESBL肺炎克雷伯菌的耐药率高达80％以上,使得治疗无效例数增加,应重点关注时间区域中病原菌耐药特性.结论 2014～2017年新生儿感染病原菌谱变化不大,前3位均为大肠埃希菌、表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯菌.新生儿感染主要为肺部感染,以革兰氏阴性菌居多,并应重点关注感染部位致病菌特点及时间区域中病原菌耐药特性.