摘要:
目的 筛选与鉴定甲状腺恶性潜能未定的高分化肿瘤(WT-UMP)差异表达蛋白质分子,寻找新的蛋白质标志物.方法 收集2015年1月~2016年12月云南省第一人民医院(以下简称“我院”)手术切除新鲜标本甲状腺WT-UMP 20例及其周围正常甲状腺组织20例,另收集2016年1~12月我院病理科甲状腺乳头状癌(PTC)蜡块30例.从冰冻新鲜样本中分别提取总蛋白进行双向凝胶电泳(2-DE),经PDQuest 7.3图像分析软件检测表达差异点,利用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和SWISS-PROT数据库对差异蛋白进行鉴定,通过PANTHER分析对差异蛋白进行分类,选择其中5种差异表达蛋白通过免疫组织化学染色进行验证.结果 共鉴定出27种差异蛋白,在甲状腺WT-UMP中呈高表达的25个,呈低表达的2个.免疫组化染色显示5种蛋白Cytosolic non-specific dipeptidase (CNDP2)、Cytokeratin18(CK18)、Cathepsin B(CTSB)、Calreticulin (CRT)及Annexin A5(ANXA5)均定位于细胞浆.CK18、CTSB、CRT及ANXA5这4种蛋白的表达在WT-UMP中均高于正常甲状腺,差异有统计学意义(P<0.05),在PTC中均高于WT-UMP,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功筛选了甲状腺WT-UMP差异表达蛋白质分子,这些蛋白质表达的改变,可能参与了WT-UMP的发生和发展.同时通过免疫组化的验证,有利于WT-UMP的早期诊断.