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机构:
[1]云南省第一人民医院心脏大血管外科,云南省昆明市,650032
外科片
心脏大血管外科
云南省第一人民医院
出处:
ISSN:
关键词:
干细胞
培养
融合基因
重组慢病毒
IDO
国家自然科学基金
摘要:
背景:器官移植后的免疫排斥反应或免疫抑制药物严重不良反应使患者得不到有效治疗、治疗效果不佳。基于此背景下,结合最新免疫调节研究结果,试图寻找到一种有效的生物免疫抑制方法。<br> 目的:构建过表达吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)慢病毒载体。<br> 方法:①将已构建成功的IDO基因插入慢病毒包装质粒GV308中,构建GV308-IDO重组慢病毒包装质粒。②用慢病毒包装辅助元件Psi、 cPPT、3FLAG、TetR、IRES、WRPE、TetIIP、Ubiquitin Promoter、SV40 origin及HIV的基本元件5’LTR 和3’LTR,共培养法转染80%融合的293T细胞。<br> 结果与结论:Western blot检测经10 g/L 琼脂糖凝胶电泳可见在 Mr 48000处有一目的片段,该值与IDO蛋白大小一致。RT-PCR检测可见293T细胞中有IDO基因表达。说明IDO融合基因已经成功重组于慢病毒包装质粒内。
基金:
国家自然科学基金(81460073);云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项(2014FB089)
第一作者:
第一作者机构:
[1]云南省第一人民医院心脏大血管外科,云南省昆明市,650032
通讯作者:
通讯机构:
[1]云南省第一人民医院心脏大血管外科,云南省昆明市,650032
[*1]云南省第一人民医院心脏大血管外科 ,云南省昆明市 650032
推荐引用方式(GB/T 7714):
贺继刚,李洪荣,桂龙升,等.过表达吲哚-2,3双加氧酶慢病毒载体的构建[J].中国组织工程研究.2015,19(36):5859-5864.