资源类型：
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◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]650223,中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室
[2]100049,中国科学院研究生院
[3]650011,云南省第一人民医院检验科
医技片
检验科
云南省第一人民医院
出处：
ISSN：
关键词：
Syncytin
原核表达
多克隆抗体
摘要：
目的 克隆人syncytin基因并在大肠杆菌中表达,并用表达后的融合蛋白制备syncytin蛋白多克降抗体.方法 PCR扩增人syncytin基因编码区的DNA片段,将其克隆人原核表达质粒pET30a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导产生syncytin-His融合蛋白.采用割胶回收的方法纯化目的 蛋白,免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体.通过ELISA、Western-Blot和免疫组织化学等方法来检测抗体的灵敏度和特异性.结果 成功表达并纯化了syncytin-His融合蛋白,SDS-PAGE分析表明融合蛋白主要以包涵体形式存在;ELISA法测定抗体效价为1:10000:Western-Blot和免疫组织化学结果显示所制备的抗体能特异性识别syn-cytin蛋白.结论 成功制备和鉴定了人svncvtin多克隆抗体,多克隆抗体特异性强和效价高,为下一步研究Syncytin的生物学功能奠定了基础.
基金：
中国科学院"西部之光"人才计划在职博士生资助项目
第一作者：
第一作者机构：
[1]650223,中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室
[2]100049,中国科学院研究生院
[3]650011,云南省第一人民医院检验科
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
孙鹥,庞伟,欧阳东云,等.Syncytin蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定[J].免疫学杂志.2010,26(02):124-127+131.
