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机构：
[1]昆明医科大学附属昆华医院消化内科,云南,昆明,650032
内科片
消化内科
云南省第一人民医院
出处：
ISSN：
关键词：
分离
大鼠
肝星状细胞
摘要：
目的 建立一种经济、稳定可靠的HSC分离方法,为体外研究提供细胞模型.方法 Hanks液在体灌洗大鼠肝脏,离体后用Ⅳ胶原酶、链蛋白酶、DNaseI消化肝脏,12% Nycodenz连续梯度液分离大鼠HSC,计数细胞得率,0.2%台盼蓝染色计算细胞活率.自发荧光、Desmin、α-SMA免疫荧光染色对HSC进行鉴定和纯度分析.结果 分离HSC得率(3.7±0.6)×107/只大鼠,细胞活率＞90%,分离第1天自发荧光和第3天desmin 染色阳性细胞＞90%.HSC随着体外培养形态明显改变,分离培养7 d后α-SMA阳性细胞>90%,培养14 d或传代后＞95%.结论 肝脏离体后消化能达到在体消化同样的效果,应用Nycodenz密度分离介质可获得满意的HSC得率和纯度.
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医科大学附属昆华医院消化内科,云南,昆明,650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
李玉莲,宋正己,范红,等.建立一种改良方法分离大鼠肝星状细胞[J].昆明医学院学报.2012,33(6):18-20,24.
