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文章类型:
机构:
[1]云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院心脏大血管外科,云南省昆明市 650032
外科片
心脏大血管外科
云南省第一人民医院
[2]云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院重症医学科,云南省昆明市 650032
外科片
重症医学科
云南省第一人民医院
出处:
ISSN:
关键词:
心肌梗死
心肌损伤
骨髓间充质干细胞
GATA-4
外泌体
miR-330-3p
摘要:
背景:前期实验已经证明过表达GATA-4骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的外泌体(exosomes)可以通过抑制心肌细胞凋亡,有效修复心肌梗死引起的心肌损伤,进一步发现在其外泌体中miRNA-330-3p明显高表达且功能涉及抗凋亡,提示miRNA-330-3p可能是外泌体修复心肌损伤的关键分子.目的:探讨过表达GATA-4小鼠BMSCs分泌的外泌体(BMSCsGATA-4-exosomes)中miR-330-3p的时-量变化.方法:在过表达 GATA-4 小鼠 BMSCs 培养体系内加入 miR-330-3p 模拟剂(miR-330-3p-mimic)及抑制剂(miR-330-3p-inhibitor)作为 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组及 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组,将 BMSCsGATA-4组、BMSCsGATA-4-空载体组、BMSCs组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic-空载体组及BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor-空载体组作为混杂因素对照组.上述各组与基因开启剂强力霉素共培养24,48 h,提取各组细胞分泌的外泌体.采用RT-PCR 检测各组细胞及其外泌体内 miR-330-3p 的表达量.采用光镜评估 BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组与BMSCs组细胞在24,48 h的形态变化.结果与结论:①BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组细胞与外泌体内 miR-330-3p 的表达率最高,且随着时间推移其miR-330-3p的表达逐渐增多;②BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组细胞与外泌体内miR-330-3p的表达率最低,且随着时间推移其 miR-330-3p 的表达逐渐减少;③BMSCsGATA-4-miR-330-3p-mimic组、BMSCsGATA-4-miR-330-3p-inhibitor组与BMSCs组在24,48 h的形态无变化;④结果表明,BMSCs内miR-330-3p表达与外泌体内miR-330-3p表达正相关,BMSCs过表达miR-330-3p可以有效提高外泌体中miR-330-3p的表达,而静默miR-330-3p可以有效减少外泌体中miR-330-3p的表达.
基金:
国家自然科学基金(81460073);项目负责人:贺继刚,云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项(2014FB089),云南省教育厅科学研究基金(2015Z051);中国博士后科学基金(2015M582764XB);成都医学院2015年度科研项目(CYZ15-18);云南省医学后备人才(H-201607)
基金编号:
81460073
第一作者:
第一作者机构:
[1]云南省第一人民医院,昆明理工大学附属医院心脏大血管外科,云南省昆明市 650032
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
贺继刚,谢巧丽,王梓豪,等.过表达GATA-4骨髓间充质干细胞外泌体中miR-330-3p的时-量变化[J].中国组织工程研究.2019,23(29):4617-4622.