资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型:
机构:
[1]昆明理工大学医学院,昆明,650500
[2]云南省第一人民医院,昆明,650032
云南省第一人民医院
[3]中国医学科学院 医学生物研究所,昆明,650038
出处:
ISSN:
关键词:
ING5
真核表达载体
戊型肝炎病毒
摘要:
目的 构建ING5基因真核表达载体和ING5荧光素酶载体,将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒与PUC-HEV质粒共转染293T细胞后,验证HEV与ING5之间相互关系.方法 通过提取293T细胞总RNA,RT-PCR法扩增ING5基因序列,并克隆到真核表达载体PGC3.1(+)上.利用脂质体转染法将PGC-ING5真核表达质粒转染HepG2细胞后,通过Western Blot法检测ING5表达情况;将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒和PUC-HEV质粒共转染293T细胞进一步探究ING5与HEV之间相互作用关系.结果 经双酶切和测序鉴定真核表达质粒PGC-ING5构建成功,ING5基因在HepG2细胞中成功表达;将pMIR-Report-ING5荧光素酶质粒与PUC-HEV质粒共转染293T细胞后,发现HEV明显抑制239T细胞中pMIR-Report-ING5荧光素酶的活性.结论 成功构建了PGC-ING5真核表达载体和pMIR-Report-ING5荧光素酶载体,并且证明HEV与ING5之间具有相互作用.
基金:
国家自然科学基金项目(81660338,31360619)%协和青年科研基金(2017310038)%中央高校基本科研业务费专项资金资助(2016ZX310179-3)
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明理工大学医学院,昆明,650500
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
司徒健文,龙飞燕,杨臣臣,等.戊型肝炎病毒与ING5相互作用的研究[J].中国人兽共患病学报.2018,34(07):603-607.