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N端规则泛素E3连接酶UBR2真核表达载体的构建及验证

Construction of Eukaryotic Expression Vector of N-end Rule Ubiquit-in Ligase UBR2 and Its Identification

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文献详情

资源类型：

收录情况： ◇ 统计源期刊

作者：
刘承波[1] * ; 赵晗[1] ; 黄慧娟[1] ; 刘靖[1] ; 朱彩芬[1] ; 冯云[1] ;
机构： [1]云南省第一人民医院(昆明理工大学附属医院) 昆明市,650032
出处：
DOI： 10.3870/j.issn.1672-8009.2017.06.003
ISSN：

关键词： N-端规则泛素E3连接酶 UBR2 过表达

摘要：
目的 构建N-端规则泛素E3连接酶UBR2过表达载体,并检测它在HepG2细胞中的过表达效率.方法 通过提取HepG2细胞总RNA, RT-PCR扩增UBR2基因片段,插入到pEGFP-N2载体中,构建真核表达载体pEGFP-N2-UBR2,并转染HepG2细胞,转染后利用荧光显微镜,Western印迹检测UBR2的表达情况.结果 经双酶切和测序鉴定真核表达质粒pEGFP-N2-UBR2构建正确;转染后24 h,利用荧光显微镜观察,在转染pEGFP-N2-UBR2的HepG2细胞中观察到绿色荧光蛋白,在蛋白水平可以检测到UBR2蛋白过表达.结论 成功构建pEGFP-N2-UBR2过表达载体,并在HepG2细胞中验证其过表达效率.为今后研究其在细胞生长和增殖过程中的作用奠定基础.

基金：
云南省卫生科技计划项目(2014NS193, 2014NS194, 2014NS195, 2014NS196)%云南省科技惠民计划项目(2014RA019)%云南省创新团队项目(No.2017HC009)This work was supported by grants from Yunnan Health Science and Tech-nology Program(2014NS193, 2014NS194, 2014NS195, 2014NS196)%Huimin Project of Science and Technology in Yunnan Province(No.2014RA019)Innovation Team Project of Yunnan Prov-ince(2017HC009)
语种：
中文
第一作者：
第一作者机构： [1]云南省第一人民医院(昆明理工大学附属医院) 昆明市,650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
刘承波,赵晗,黄慧娟,等.N端规则泛素E3连接酶UBR2真核表达载体的构建及验证[J].医学分子生物学杂志.2017,14(6):323-326.

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