摘要：
目的 研究Aβ25-35对PC12细胞内Ca2+浓度和自噬发生的影响.方法 培养PC12细胞,分别用0、5、10 μmol/L Aβ25-35处理24 h,用MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度,单丹磺酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色观察自噬泡,共聚焦显微镜检测LC3-Ⅱ表达,透射电镜观察细胞超微结构.结果 5、10μmol/LAβ25-35处理24 h后,PC12细胞存活率分别为(64.6±2.3)％和(41.3±4.1)％,与对照组相比显著下降(P＜0.05),细胞内游离Ca2+浓度升高(P＜0.05).与此同时,随着Aβ25-35浓度升高,显微镜下可见细胞皱缩、变圆,与对照组相比,细胞内MDC阳性颗粒增多,LC3-Ⅱ荧光强度增强(P＜0.05),与Aβ25-35呈浓度依赖关系.电镜下可见单(双)层膜样自噬体.结论 Aβ25-35诱导PC12细胞发生自噬呈浓度依赖关系,其发生可能与细胞内游离Ca2+浓度升高有关.
