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[1]昆明医科大学附属昆华医院,云南省第一人民医院内分泌科,云南 昆明650032
内科片
内分泌科
云南省第一人民医院
[2]昆明医科大学附属昆华医院基础研究所,云南昆明,650032
云南省第一人民医院
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关键词：
小鼠胰岛
多点注射
分离纯化
摘要：
目的 探讨小鼠胰岛分离与纯化的方法.方法 采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化胰岛.双硫腙特异性染色后计算胰岛产量及纯度.葡萄糖刺激后测定培养上清液胰岛素水平检测胰岛功能.结果 (1)每只小鼠采用上述分离、纯化法平均得到(114±15)个胰岛,平均纯度为(77.12±3.23)％,胰岛细胞存活率＞90％； (2)分离、纯化的胰岛培养上清液中胰岛素水平在无糖、低糖(2.8 mmol/L)和高糖(22.2 mmol/L)刺激下分别为(23.80±3.52) mIU/L、 (67.57 ±4.04) mIU/L和(164.32±10.75) mIU/L,各组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两两比较,低糖组的胰岛素水平为无糖组的2.84倍(P＜ 0.05),高糖组的胰岛素水平为低糖组的2.43倍(P＜0.05),高糖组的胰岛素水平为无糖组的6.90倍(P＜0.05).结论 采用多点注射灌注胶原酶法消化胰腺,不连续密度梯度离心联合人工挑取的方法分离、纯化的小鼠胰岛产量及纯度较高,形态完整,不同浓度葡萄糖刺激后胰岛素分泌反应良好,是一种简便、快捷的小鼠胰岛分离方法.
基金：
云南省自然科学基金资助项目(2005C0002R)%云南省中青年学术技术带头人后备人才项目(2007PY01-32)
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医科大学附属昆华医院,云南省第一人民医院内分泌科,云南 昆明650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
合湫,苏恒,李超,等.简便快捷的小鼠胰岛分离纯化方法研究[J].昆明医科大学学报.2012,33(08):6-9.
