目的 建立人脂肪源性干细胞(human adipose derived stem cells,hADSCs)的培养体系,并观察其生物学特性.方法 用Ⅰ型胶原酶消化成人皮下脂肪组织获取hADSCs,将其培养在含100ml/L胎牛血清的低糖DMEM培养液中,用2.5g/L胰蛋白酶0.2g/L乙二胺四乙酸(EDTA)消化传代.在倒置相差显微镜下观察细胞形态;用细胞计数法测定第3代、8代hADSCs生长曲线;用流式细胞术检测细胞表型CD44、CD90、CD105、CD34及CD45;用免疫组化检测波形蛋白的表达;以含地塞米松、胰岛素、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤(IBMX)的培养液诱导其分化为脂肪样细胞,并用油红O染色鉴定.结果 在倒置相差显微镜下观察ADSCs为贴壁生长的成纤维样细胞,长梭形,平行排列.细胞传代后2d内处于潜伏期,第3天进入生长期,第7天进入平台期.流式细胞术检测CD44、CD90、CD105的阳性细胞分别为100%、98.6%、99.5%;而CD34、CD45为阴性.免疫组化检测ADSCs表达波形蛋白为强阳性.经成脂定向诱导后,hADSCs胞体变圆,胞质出现脂滴,油红O染色为阳性.结论 Ⅰ型胶原酶消化法能有效从成人皮下脂肪组织分离获取hADSCs.hADSCs为贴壁生长的成纤维样细胞,体外增殖活跃,具有成脂潜能,为组织工程提供一种新的种子细胞源.