目的 构建针对乙肝病毒的DNA疫苗，并检测该DNA疫苗免疫BALB/c小鼠的效果。方法 选择乙肝病毒表面蛋白中的LHBs蛋白基因作为抗原基因，以pHL-sec真核外泌型质粒为载体构建pHL-sec-LHBs质粒。使用pHL-sec-LHBs质粒、pHL-sec-LHBs质粒瞬时转染细胞上清和pHL-sec空载质粒在无佐剂或有佐剂条件下分别对BALB/c小鼠进行免疫，共计免疫5次，每次间隔14 d。第5次免疫7 d后对小鼠进行LHBs蛋白特异性抗体检测。结果 成功构建pHL-sec-LHBs重组质粒。使用该质粒瞬转293T细胞，Western blot检测到细胞内LHBs蛋白的表达，并有自切外泌信号肽迹象；ELISA检测细胞上清中LHBs蛋白成功外泌。BALB/c小鼠免疫试验显示，pHL-sec-LHBs质粒成功诱发小鼠针对LHBs蛋白特异性抗体产生。结论 成功构建pHL-sec-LHBs重组质粒作为乙肝病毒DNA疫苗，该疫苗对BALB/c小鼠中具有良好的免疫原性。