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◇ 统计源期刊
文章类型:
机构:
[1]昆明理工大学生命科学与技术学院,云南昆明 650504
[2]昆明理工大学附属昆华医院检验科,云南昆明650032
医技片
检验科
云南省第一人民医院
出处:
ISSN:
关键词:
RNA干扰
慢病毒载体
Syncytin基因
Jurkat细胞系
摘要:
目的 构建PGC-LV-syncytin慢病毒载体并建立Syncytin基因表达下调的Jurkat细胞系.方法 利用RNA干扰序列软件设计并筛选有效干扰序列,将构建好的Syncytin表达质粒与慢病毒包装质粒共转染至包装细胞293T,包装产生病毒颗粒后感染Jurkat细胞,获得Syncytin稳定沉默的细胞系.荧光显微镜下观察感染效率,分别使用Real time PCR和Annexin V-APC单染法结合流式细胞仪检测目的基因表达水平和细胞凋亡率.结果成功构建了具有Syncytin干扰效果的慢病毒载体及其稳定沉默的Jurkat细胞系.结论 该细胞系的构建为进一步研究Syncytin基因在白血病的功能提供了细胞模型.
基金:
国家自然科学基金资助项目(81100377); 云南省应用基础研究基金资助项目(2013FB203,2012FB096)
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明理工大学生命科学与技术学院,云南昆明 650504
[2]昆明理工大学附属昆华医院检验科,云南昆明650032
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
郑志,牛华,陶瑞,等.Syncytin慢病毒干扰载体及syncytin沉默Jurkat细胞系的建立[J].昆明医科大学学报.2014,35(8):12-15.